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DPI“分子显微镜”原理

Dual Polarisation Interferometry(DPI)即双偏振极化干涉测量分析系统的理论基础为200年前Thomas Yuong的干涉实验,如图,当光源通过相邻的两道狭缝后会在狭缝后面发生干涉,在某一聚焦平面上产生明暗的条纹,同样如果用两片平板光导介质代替两个狭缝,光源发出的光便会在通过光导介质后产生干涉条纹,用适当的光检测器进行检测可得到动态的干涉变化。

当用物理或者化学的方法将被测样品(如蛋白质或表面活性剂等)吸附在其中某一个光导界面上后,将另外一种液相物质(如金属离子或者药物小分子等)流经被测物表面时,两相分子之间会产生相互作用,当特异性作用发生时,干涉光谱会有明显变化,通过监测干涉光谱的变化实时检测被测物质与其它小分子相互作用时的被测物质的空间构象实时变化以及相应热力学及动力学参数的变化。见下图:

DPI技术与SPR相比最大的区别在于,SPR是一种传感器定性测量技术,而DPI是一种高分辨率的实时定量测量技术,它不仅给出相互作用的动力学及热力学参数,来判定特异性的结合,而且给出在相互作用时被测物分子的空间构型变化,密度、厚度、质量的变化;以及在外界因素影响下,被测物自身的分子空间构型变化,如蛋白质在不同PH值或者不同浓度的金属离子环境中分子空间构象变化或自身聚集情况的定量测量,用来筛选影响蛋白聚集的外界因素等。DPI技术可以实施测量到分子<0.1A的空间构象(尺寸)的变化,以及<0.1pg/平方毫米的密度变化,可以检测到分子量为100000Da的生物大分子上结合的质量<50Da的小分子中,分辨率为5Da的质量变化。

 
 
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